巴伦葛兹类芽孢杆菌和米黑根毛霉的几丁质酶生化性质研究
几丁质酶在生物防治、生物质转化和功能性低聚寡糖生产等领域具有广大的运用,一直受到高度关注。巴伦葛兹类芽孢杆菌是一株嗜热海洋细菌,以几丁质作为诱导物时能分泌多种胞外几丁质酶。
本文主要研究和讨论了产几丁质酶微生物的筛选及鉴定,发酵条件优化,以及天然几丁质酶的纯化和生化性质。此外,还研究了两种重组几丁质酶的克隆表达、性质及相关应用,论文主要结论如下:(1)从中国南海海水样中筛选获得一株高产几丁质酶的细菌CAU904,通过形态学观察、16S rDNA序列比对及生理生化实验鉴定为巴伦葛兹类芽孢杆菌(Paenibacilus barengoltzii)。
使用不同的碳源、氮源、温度、初始pH、表面活性剂以及发酵时间的单因素优化试验取得最佳发酵条件为:0.5%(w/v)胶体几丁质,0.2%(w/v)酵母浸提物,0.1%(w/v)吐温-80,发酵培养基初始pH为7.0,45℃下培养72 h。其最优发酵产酶条件在优化后发酵条件下,巴伦葛兹类芽孢杆菌最大产酶水平提高至8.2 UmL-1,比优化前提高了5.4倍。
几丁质酶的酶谱结果分析显示,该菌株可以 ...
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