小麦矮腥黑粉菌分子检测体系的建立及侵染循环的观察
小麦矮腥黑粉菌(Tilletia controversa Kühn,TCK)引起的小麦矮腥黑粉病(Wheat dwarf bunt disease,DB)是一种系统侵染性病害,是极难防治的国内外重要检疫性病害之一。在生物学性状上,小麦矮腥黑粉菌与小麦网腥黑粉菌、小麦光腥黑粉菌等多种腥黑粉菌极为相似,采用传统检疫手段难以将其区分。
因此,有必要研究开发快速、准确的病害分子检测技术。真菌在寄主体内以菌丝体形式发育为冬孢子完成整个侵染循环,与寄主演化形成和谐互作模式。
本试验依据实验室前期筛选TCK独有661bp大小的基因组差异片段设计TCK特异性引物,建立分子检测技术体系同时应用激光共聚焦显微镜和电子显微镜观察研究TCK与寄主互作的细胞学特征和超微结构观察。研究结果如下:1.成功建立了两套常规PCR检测体系,目的条带分别为372、112bp。
建立的PCR检测体系特异性强,能扩增出不同菌株的TCK DNA片段,而对Tilletia tritici Tul(TCT)的不同菌株和其他近源种DNA都不能扩增;PCR可检测出模板DNA为1个冬孢子。 ...