以TLR7激动剂为佐剂免疫治疗粉尘螨过敏性哮喘模型的研究
过敏性哮喘是一种以气道炎症为特征的慢性疾病,主要由抗原特异性Th2型细胞产生的细胞因子分泌失调引起。研究表明刺激Toll样受体7(TLR7)不仅能够触发抗病毒反应,还能够减轻试验性的过敏性哮喘。
在本研究中,我们将一种新化学合成的多功能TLR7激动剂(TLR7a)结合到粉尘螨抗原重组Der f1蛋白上,用来免疫治疗粉尘螨过敏性哮喘小鼠,研究此新型疫苗的免疫调节效果和分子机制。方法:首先构建TLR7a-Der f1疫苗。
根据蛋白质在280nm处的紫外吸收峰测定TLR7a-Der f1的偶联度。SDS-PAGE和圆二色谱分析蛋白结构是否发生改变。
分别用Western-blot和ELISA检测TLR7a-Der f1的免疫原性和免疫抗原性。然后用粉尘螨粗蛋白致敏小鼠建立过敏性哮喘模型。
免疫治疗后,立即评估小鼠气道高反应性(AHR),检测血清中特异性IgE、IgG2a和IgG1抗体的水平,收集肺泡灌洗液和脾细胞培养上清检测Th1/Th2型细胞因子的表达(IL-4、IL-10、IFN-γ和IL-12),观察肺组织的病理学变化。结果: ...
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