海滨锦葵茎尖再生体系建立及GPD1和DGAT植物表达载体构建
为了提高海滨锦葵含油量,促进生物柴油产业发展,缓解能源危机给全球带来的压力,本实验以海滨锦葵茎尖为外植体,对海滨锦葵组织培养进行优化,建立了良好的高频的植株再生体系。并构建了高效的高含油量种子特异启动子napin驱动的GPD1和DGAT植物表达载体。
为今后建立高频、高效海滨锦葵再生体系,利用转基因方法培育优良的、高含油量的海滨锦葵新品系提供一些参考数据。以下为本研究主要进行的工作和取得的主要结论:1.用98%的浓硫酸浸泡海滨锦葵种子1h左右,无菌水将表面浓硫酸冲洗干净,无菌水浸泡10h以上至种子露白,剥去种皮后接种到培养基上以获取无菌苗。
取3日苗龄的无菌苗,用镊子和解剖刀将茎顶生长点除去,切取0.5～1.0mm茎尖分生组织接种到培养基上。培养温度为(26±1)℃;相对湿度为70%～80%;光照时间为14h/d;光照强度为2000lx。
以MS(蔗糖3%、琼脂0.8%、pH值5.8)培养基为基本培养基。海滨锦葵茎尖萌发最适培养基为MS+IAA0.3mg/L+ZT0.3mg/L,萌发率为91.11%;增殖最适培养基为MS+I ...