海岛棉（G.barbadense L.）茎尖再生体系的建立及农杆菌介导抗虫基因（Bt；SATI）转化研究
本实验以海岛棉新海20,新海16,K222,97006为转化受体品种(系),采用农杆菌介导法将抗虫基因BT、SATI转化棉花茎尖外植体。通过对影响组织培养和转化的相关因素的研究,建立起了适宜于海岛棉的农杆菌介导的茎尖遗传转化体系。
本研究为海岛棉转基因育种提供了技术支持。主要研究结果如下:1.建立了海岛棉茎尖再生体系。
无菌条件下,脱绒种子用70%乙醇浸润30S,再经过0.1%的升汞消毒10min后,用无菌水冲洗3-5次,28℃,浸种12-16h至“露白”,剥去种皮在自来水发芽培养基上生长。以MSB5(即MS1)为基本培养基,取不同苗龄茎尖在附加不同浓度激素的培养基中继代培养,对不同的培养基进行筛选优化。
在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L与1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L再生效果较好;同时,结果表明,棉花茎尖诱导成苗时,基因型之间差异不显著。2.建立了以海岛棉茎尖为受体的转化体系。
通过对影响转化频率相关因子的研究,以及对头孢霉素(Ce ...