乳鼠肾细胞的原代培养
生05 边晔 2010030026
周二班同组同学：
解智博实验时间2012年11月12日
实验背景
细胞分离技术
根据所取组织可分为：
离心分离法（细胞外液环境）；机械分离法（如切割，挤压等）；化学分散法（如酶）；细胞表面抗原等。
培养细胞的纯化
自然纯化；
人工纯化。人工纯化又包括酶消化法，反复贴壁法，机械刮除法，克隆法，培养基限定法，流式细胞仪
等。细胞冻存与复苏
基本原则：慢冻快融。
实验步骤
取出肾脏
将乳鼠（3天左右）
用剪刀断头放血致死。
进入无菌间，
用70%乙醇消毒乳鼠体表，将其固定在蜡盘上。
在超净台内，将其背部皮肤剪出一个“工”字型开口，然后将皮肤拉开，固定在蜡盘上，使其腰背部肌肉暴露出来。
用70%乙醇消毒背部肌肉，在脊柱两侧各剪一切口，取出肾脏，置于盛有
PBS溶液的平皿中
。（由于肾太小不易操作，故未
除去肾膜与脂肪等）
纵向将肾脏剪开（除去肾盂）。
将肾脏剪成数块，用PBS溶液再洗涤一次。
吸弃PBS溶液，将肾脏剪碎（
小而均匀
，肉泥状
）。消化法原代培养
加入0.5mL
胰酶—EDTA
溶液，于
37℃消化15
分钟，直至组织块变 ...