蛋白激酶B抑制剂派立福辛联合神经酰胺C6抗人脑胶质瘤的机制研究
目的:观察蛋白激酶B抑制剂哌立福辛(perifosine)、神经酰胺C6(ceramide)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、自噬等生物学行为的影响,探讨哌立福辛与神经酰胺C6联合用药的协同机制,为脑胶质瘤的靶向治疗提供理论依据。方法:1.对胶质瘤细胞予以不同浓度及时间的哌立福辛处理,运用MTT法及细胞集落实验检测肿瘤细胞增殖活性;组蛋白DNA ELISA法及Annexin V/PI双染法检测肿瘤细胞凋亡改变;Western-Blot法检测AKT1、p-AKT、p-S6、p-AMPKα、p-ACC以及ATG-5、LC-3B、Beclin-1的表达情况;高效液相色谱法检测胶质瘤细胞内神经酰胺的水平的变化。
2.对胶质瘤细胞予以不同浓度及时间的神经酰胺C6处理,MTT法检测其对细胞活力的影响;神经酰胺C6、哌立福辛以及二者联合处理胶质瘤细胞,运用MTT法、Trypan blue实验检测肿瘤细胞活性改变;Western-Blot法检测ERK、p-AKT、p-S6、p-S6K、p-ERK以及ATG-5、LC-3B、Beclin-1的表达情 ...