标准曲线理论 Page 1 of 1
标准曲线理论
可以用吸收率来预测化合物的检测浓度下限。真正的分光光度计有一定的“动态范围”或吸收范围,在此范围内才能应用。
测定非常稀的样品(高能量,高透射率,低吸收)时,受到噪声的限制。在测定高浓度样品( 低能量,低透射率,高吸收)时,
则受到杂散光的限制。杂散光可以定义为除了测定波长以外的任意波长的光,通过样品后被检测器测定的光。杂散光主要来
自分光光度计波长选择单元的不完善性,不能真正 100% 地给出单色光。杂散光导致测得的吸收小于实际样品的吸收。
一般认为比尔定律适用于稀溶液或样品的吸收小于或等于十分之几的场合。实际测定时,通常需制备几个不同的已知浓度的
标准,并把待测样品的浓度包括在此范围内,然后在特定的波长下测定这个系列的标准样品,用测得的吸收值对制备的浓度
作图,该图通常称为“标准曲线”。 根据样品的吸收值,在标准曲线上求得未知样品中相同组分的浓度。见下图。
z 制备样品含有 1-10 mg/mL 的化合物 A ( 标准系列)。
z ...
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