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2025-05-28
实验二:细菌的简单染色和
革兰染色一、实验目的
1.掌握细菌涂片的制备方法。
2.掌握细菌简单染色和
革兰染色法的原理及操作步骤,识别细菌的革兰染色结果。
3.巩固显微镜油镜的
使用方法。
4.学习无菌操作技术。
二、实验原理
1、染色原理:
细菌生长于酸性、中性和碱性溶液时常带负电荷,所以通常采用带正电荷的碱性染料(如美蓝、甲紫、碱性复红或孔雀绿等)使其着色。
当细菌分解糖类产酸时,细菌所带正电荷增加易被带负电的酸性染料(如伊红
、酸性复红或刚果红)着色。
2、革兰染色法原理:
革兰染色法可根据细菌细胞壁结构和成分的不同,将其分为革兰阳性菌和
革兰阴性菌。
革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态,细胞壁孔径大,不能阻止溶剂透入,因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。
另外,革兰染色的差异并不能
完全认为
是化学的差别,也有物理结构不同的结果。如酵母菌细胞壁的成份完全与
细菌不同,但具有革兰染色阳性反应。
三、实验仪器,材料 ...
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