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2024-12-18
Trizol
法提取RNA注意:全程戴口罩,手套(
PE手套,胶皮手套),离心注意放置方向。
所用所有物品全部为灭
RNA酶的。器材:试剂:Trizol
β—巯基乙醇
氯仿75%乙醇DEPC
水TAE Buffer 0.8%
琼脂糖凝胶
收集细胞:
取对数期藻液
(2ml)(2x4x10
6=8x10
6个),2500 r
,3 min
离心,弃上清。将沉淀转移至研钵中,锡纸包裹,
-80℃过夜。
将固体藻取出,
研磨至细粉末状
,加入1 ml Trizol
,室温放置
5min。加入0.2 ml
氯仿,涡旋15 sec
,(剧烈震荡混匀
),室温静置
3min,4℃,12000 rpm
,15min离心。样品分三层
,取上清至干净离心管
。RNA沉淀:加入
0.5 ml
异丙醇,上下
轻轻混匀,室温放置
20 min
,4℃,12000 rpm
,10 min
离心。出现凝胶状沉淀
RNA洗涤:弃上清,加入
至少1 ml 75 %
乙醇,漩涡
充分,4℃,7500 rpm
,5 min
离心,弃上清,室温干燥
5 min
。重新溶解
RNA:
加入50 ul RNase-free
水 ...
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Trizol法提取RNA.docx

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