布比卡因与左旋布比卡因对大肠癌细胞的作用及其与内质网应激通路的相关性研究
目的:研究1mM布比卡因与1mM左旋布比卡因培养24-48小时后人大肠腺癌细胞系Caco-2的各项肿瘤细胞活性指标以及内质网应激通路标志蛋白的表达水平,包括:癌细胞迁移能力,核蛋白Ki67,膜联蛋白V(Annexin V)和碘化丙啶(PI),78kDa葡萄糖调节蛋白(Grp78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)。方法:本实验于体外培养人大肠腺癌细胞株Caco-2并将细胞随机分为四组:空白组(N组);载体对照组(V组)-1mM DPBS液;布比卡因组(B组)-1mM盐酸布比卡因;左旋布比卡因组(L组)-1mM盐酸左旋布比卡因。
各组在相同条件下培养24小时后(划痕实验取24小时与48小时两个时间点),使用细胞划痕实验以检测癌细胞的迁移能力;使用免疫荧光技术计算Ki67阳性率比较组间细胞周期情况;使用流式细胞术检测膜联蛋白V和碘化丙啶的表达情况以研究大肠癌细胞的凋亡水平;使用蛋白免疫印迹法和免疫荧光实检测内质网应激通路标志蛋白Grp78和CHOP的表达水平与核聚集现象。结果:在连续48小时体外培养过程中,布比卡因组( ...