多通道毛细管色谱柱装填装置研制及初步应用
目前纳升级液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术已经成为蛋白质组研究的主流技术之一,液相色谱法的高效分离和质谱的高灵敏分析是提高蛋白质组的覆盖率和定量准确性的关键。而作为LC-MS分析的关键技术,液相分离的核心是液相色谱柱,它能直接决定样品的分离度进而影响定性和定量结果的准确性。
选择更小粒径的填料和更长的毛细管色谱柱可以有效地提高柱效、改善分离效果。对于这类毛细管色谱柱的制备以及目前色谱柱的大规模使用,目前常用的基于气压法装填技术由于装柱压力小、速度慢,已经不能满足需求,且不同批次装填的毛细管色谱柱柱效一致性不易保证。
因此,本论文介绍了一种快速装填这类毛细管色谱柱的装置,并将以此装置装填得到的毛细管色谱柱应用于蛋白质组的定性和定量中。另外,蛋白质是生命活动重要的执行者,它的糖基化修饰是一种分布最为广泛且非常重要的蛋白翻译后修饰,几乎参与了所有的生命过程而且存在于多种重大疾病中,如恶性肿瘤、糖尿病、神经系统疾病等。
因此糖基化修饰蛋白的研究对临床诊断和治疗具有重要的指导作用。但是,由于糖基化修饰属于非模板合成,其微不均一性和低丰度表达给糖基化的 ...