大肠杆菌系统改造及琥珀酸和5-氨基乙酰丙酸合成途径的构建
进入21世纪,随着环境污染和石油资源的日益枯竭,可持续发展已经深入人心。而工业微生物作为可持续发展的一个重要支撑,是解决资源危机、生态环境危机以及改造传统产业的关键所在。
目前,工业微生物技术已经渗透到包括医药、农业、能源、化工、环保等几乎所有的工业领域,并扮演着越来越重要角色。而代谢工程已经发展成为一种最有力的优化微生物代谢途径、提高微生物目标产物生产能力的工具。
大肠杆菌作为一种研究最透彻的模式微生物具有无可比拟的优越性：遗传背景清晰、易操作、生长迅速、营养要求简单等。因此,通过基因工程改造大肠杆菌发酵生产重要的工业产品,实现工业原材料来源的根本转变具有重要意义。
本研究首先在分析了大肠杆菌基因表达调控方式的基础上,构建了一种环境压力诱导型的表达系统。该系统不依赖于人为诱导剂的添加,当菌体进入对数生长期后期,该系统被诱导并转录下游基因。
在分析该表达系统的特点后,我们成功将该系统应用于聚羟基丁酸酯(PHB)的发酵生产中。发酵结果显示工程菌株DH5α(pQKZ103)在不添加任何诱导剂的条件下积累菌体干重、PHB浓度以及PHB ...