产酶溶杆菌转录因子LeClp调控几丁质酶和次级代谢产物生物合成的机制研究
产酶溶杆菌OH11 (Lysobacter enzymogenes OH11)是本实验室于2003年从辣椒根际土壤中分离到的一株具有自主知识产权的重要生防细菌,其能产生胞外几丁质酶、抗真菌代谢产物HSAF、抗细菌活性物质WAP-8294A2等胞外酶和次级抗菌代谢产物,对多种植物病原菌均有较强的抑制能力,具有十分广阔的生防应用前景。LeClp(cAMP-receptor like protein)是一类重要的转录调控因子。
在本实验室的前期研究中发现,LeClp在产酶溶杆菌OH11中可调控3种生防因子(HSAF、WAP-8294A2和胞外几丁质酶)的生物合成,但相应的机制未知。本文以产酶溶杆菌OH11为对象,深入研究了 LeClp对上述3种生防因子发挥调控作用的机制,取得了如下结果:构建LeClp蛋白的原核表达载体,并对LeClp蛋白的诱导及纯化条件进行优化,得到了大量的纯化的LeClp蛋白,这为后续进行其他相关实验,如凝胶阻滞电泳(EMSA)打下了良好的基础。
同时利用微量热泳动技术(MST)检测了 LeClp蛋 ...