大豆球蛋白、β-伴球蛋白的分离提取及对猪外周血淋巴细胞增殖和免疫功能的影响
本研究采用实验研究方法,以分离纯化豆粕中的抗原蛋白作实验材料,研究纯化抗原蛋白的特性和体外对体液免疫及细胞免疫的影响。研究分两个实验:试验一:大豆球蛋白和β—伴球蛋白分离提取。
利用豆粕中7S和11S球蛋白在pH6.1-6.6之间溶解度不同的特点,首先对两种球蛋白进行初步分离,然后利用硫酸铵进行盐析和凝胶过滤,除去非抗原蛋白组分,得到纯度相对较高的大豆球蛋白和β—伴球蛋白。结果表明:豆粕粉经0.03mMTris-HCl、料液比1:20、室温、PH8.0,提取2h,豆粕总蛋白提取率为32.88%。
可分离出蛋白质含量71.53%的11S粗组分9.1%和蛋白质含量60.73%的7S粗组分7.9%;经盐析和凝胶过滤后,可得到蛋白含量84.19%的纯化大豆球蛋白4.3%和蛋白含量79.47%的纯化β—伴球蛋白6.0%;经过SDS-PAGE电泳鉴定,11S粗组分纯度达到87.0%,7S粗组分纯度达到62.5%;纯化后的大豆球蛋白纯度达到93.8%,β-伴大豆球蛋白达到67.2%,单位豆粕含大豆球蛋白182.34g/kg, ...
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