促胰岛祖细胞分化为胰岛素分泌型细胞的高通量模型的建立及化合物筛选
促进胰岛祖细胞分化为新的β细胞,有望从根本上解决胰岛β细胞损伤和数量减少的问题。因此,寻找新的分化诱导剂促进胰岛再生,对于有效缓解和治疗糖尿病具有重要意义。
胰腺十二指肠同源框-1(PDX-1)在胰岛形成、自细胞分化及功能维持中具有至关重要的作用。本课题以PDX-1为目的基因构建高通量筛选模型,筛选出了能促进PDX-1表达,进而促进胰岛祖细胞分化为胰岛素分泌型细胞的化合物。
首先,体外诱导PANC-1分化为胰岛样细胞团,该细胞团能表达胰岛特异基因,且葡萄糖刺激后能分泌胰岛素,移植到I型糖尿病小鼠肾包膜后,小鼠血糖可恢复到正常水平。表明,我们建立了将胰岛样祖细胞分化为胰岛细胞的方法。
其次,运用蛋白免疫印迹法(WB)和免疫荧光法研究了 PDX-1在PANC-1细胞分化不同时间点的表达和分布。发现PDX-1主要在PANC-1细胞分化初期高表达并入核;而过表达PDX-1,可促进PANC-1分化及成熟。
表明,PDX-1对PANC-1细胞分化具有重要作用。再次,以PDX-1为目的基因构建高通量筛选模型,筛选出能促进PDX-1表达 ...