小麦西农538几丁质酶基因的克隆、表达及功能分析
几丁质酶是植物重要的防卫因子之一,与植物的抗病性密切相关。为了进一步扩充几丁质酶基因资源,深入了解其在小麦体内的表达特性及其功能,本研究利用通用引物ChiF/ChiR从不同的小麦材料中,克隆得到几丁质酶基因并对序列进行分析,与表达载体连接在大肠杆菌中进行表达,并利用荧光定量PCR (qRT-PCR)技术分析这些基因在西农538小麦根、茎和叶等不同组织中的表达情况。
最后,选取在西农538小麦的根、茎和叶组织中表达量较高的2个几丁质酶基因进一步研究其与条锈病菌的抗性反应试验。结果表明：1.从10份具有不同抗病性的小麦材料中,均能够克隆得到5条长度约960 bp的几丁质酶基因序列,依次命名为Cht1、Cht2、Cht3、Cht4和Cht5。
利用NCBI在线BLAST软件对这5条基因序列进行同源性比对,结果搜索到100条具有同源性的核苷酸序列,其中Cht5与来自于中国春的Chi-3基因(序列号KJ507387)完全一致,进而将剩余基因提交至GenBank,获得登录号为KR049247～KR049250。2.对新扩增到的Cht1～Cht4基因 ...