小麦应答条锈病菌冬孢子产生的蛋白质组学分析
由条形柄锈菌小麦专化型Puccinia striiformis f.sp.tritici(Pst)引起的小麦条锈病(wheat stripe rust or yellow rust)是我国小麦生产上最严重的流行病害之一。中国小麦条锈菌表现出高度的遗传多样性和毒性变异,现已研究表明小麦条锈菌经有性生殖可发生致病性变异并产生新的小种。
冬孢子作为小麦条锈菌有性阶段的开始,是小麦条锈菌生活史中完成有性生殖过程必不可少的阶段。为分析小麦条锈菌产冬孢子时期寄主的叶片总蛋白表达变化,探究寄主植物如何响应小麦条锈菌冬孢子产生,本研究通过双向电泳技术分别比较小麦条锈菌产夏孢子和冬孢子时的叶片总蛋白差异,选取显著上调表达的蛋白进行Orbitrap质谱鉴定,并运用qRT-PCR技术分析上调表达蛋白基因的转录水平表达变化,取得结果如下:1.利用三氯乙酸(TCA)/酚抽提法提取产冬孢子叶片、产夏孢子叶片和同时期各温度条件下未接种的小麦叶片总蛋白,采用双向电泳技术进行分离。
结果表明:利用TCA/酚抽提的方法提取小麦条锈菌产孢叶片总蛋白,并采用17 cm、pH 4.0 ...