线虫开放实验的补充说明
培养基倒培养基一定在超净台中完成,注意无菌操作
,平板不能高压灭菌,会变形。
线虫的食物
滴菌同样在超净台中完成,菌滴于平板中央(防止线虫爬到平板边缘干死
丢了),并且要进行测试无杂菌才可大规模使用,污染杂菌会影响观察和统计记录。
线虫的生活史和表型观察(重要)
“磨刀不误砍柴工”这两部
分是整个线虫遗传实验
最重要的基本知识。需要记录并
熟悉线虫的生活史。熟知
不同阶段的线虫(特别是L4和adult),区分雌雄同体线虫(
hermaphrodite)和雄虫(male),识别典型的突变体:unc 和dpy。
线虫的基本实验操作
(重要)
熟练使用picker(自制铂金丝小铲),达到如下要求:
注意操作迅速,干净,不污染杂菌,及时烧picker,防止交叉污染虫子和卵;
两种方法“挑”和“粘”。“挑”:在解剖镜下找到目标线虫后,用picker末端在线虫的附近压琼脂培养基,使线虫爬到picker上再转移到新的平板中;“粘”:用picker末端蘸取少量OP50,轻轻地而且快速的碰触线虫的上部,线虫被picker上的菌液粘住。
用“挑”法时,往新的平板放线虫时,注意要慢慢 ...
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