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2025-05-18
草木樨状黄芪与霸王科间体细胞杂交、PA1基因的克隆及对苜蓿的转化
本研究首先建立了草木樨状黄芪(Astragalus molilotoides pall. )和霸王(Zygophyllum xanthoxylum)两种植物的原生质体分离、培养和再生的实验体系。在此基础上,开展了这两种植物的科间体细胞杂交,建立了双亲生理互补的杂种细胞筛选体系,并获得了杂种愈伤组织。
本研究的另一部分是从食荚大菜豌(Pisum Linn. cultivar shijiadacaiwan)克隆出一个富硫氨基酸且具有抗虫性的双功能蛋白基因——PA1基因,通过农杆菌介导法将该基因转入紫花苜蓿,并获得转基因再生植株。探讨了转基因苜蓿体胚发生的变异及PA1基因在转基因紫花苜蓿中的表达。
取得的主要进展如下:1.取暗培养4d的草木樨状黄芪植株上完全伸展的嫩叶,进行60min质壁分离处理后,通过酶法游离出大量有活力的原生质体。原生质体经持续分裂形成愈伤组织并再生成植株。
比较了原生质体培养密度和外源激素组合对原生质体分裂和再生的影响。结果表明:原生质体以3.0×10~5/ml的植板密度,在附加2,4-D(2.0 mg/ ...
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