石蜡切片免疫组织化学操作流程
一、组织获取(本实验室多做脑组织,所以以脑组织为例)
1.动物麻醉:所用麻醉药物(水合氯醛水溶剂)剂量为 350mg/kg动物体重,常用麻醉药
物浓度为 5%、6%、7%、10%(麻醉浓度越大,动物进入麻醉时间越短,但麻醉致死率
相应较高,本人使用 7%浓度,若注射位置正确,约 3min进入麻醉状态);动物麻醉后,
将其固定于灌流操作平台,仰卧位;
2.动物灌流手术:以胸骨剑突为起点,沿左右两侧肋下缘剪开老鼠皮肤至腋下,再次以
剑突为起点,剪开皮下肌肉层,沿同样方向剪开肌肉至腋下,避免伤到内部脏器,剪
破膈膜,沿左右两侧剪断胸骨,用止血钳夹住剑突向上翻转,充分暴露心脏;用弯镊
分离心脏表面黏膜;左手持止血钳轻夹起心脏,倾斜一定角度,使心尖方向与升主动
脉尽量位于同一直线上,右手持灌流针,沿直线所在所在角度由左心室进针,将灌流
针直接插入升主动脉(可挑动灌流针于升主动脉内观察是否正确插入,此方法操作不
熟练易插错血管或是直接刺穿心脏——或者直接将灌流针插入左心室,但前方法灌流
效率较高);固定器械(器械松动或是位 ...
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