粟酒裂殖酵母Trz2参与线粒体RNA加工和细胞凋亡的功能研究
线粒体是真核生物细胞中一种重要的细胞器。最近的研究表明,线粒体的功能失调与多种疾病相关,如艾滋病、神经退行性疾病和癌症。
粟酒裂殖酵母是一种优秀的研究线粒体遗传学和分子生物学的模式生物,并为研究各种细胞器和核-线粒体的相互作用提供了一个良好的载体。在本研究中,我们利用改进的蔗糖梯度离心方法纯化了粟酒裂殖酵母线粒体,采取不去除小片段的方法提取了包括tRNA和小RNA在内的所有线粒体RNA,并且通过透射电镜和定量PCR验证了线粒体RNA的质量和纯度。
结合高通量测序和传统的生物学实验方法,我们对粟酒裂殖酵母的线粒体转录组进行了全面分析。线粒体转录组测序结果显示的RNAs的切割位点和基因的表达量差异表明转录后调控机制的存在。
我们确定了rnl、atp6和tRNAAsn的切割位点,并通过CR-RT-PCR验证了测序数据的可信度。trz2与人的tRNase ZL(ELAC2)高度同源,而ELAC2基因与前列腺癌及艾滋病相关。
Trz2定位在线粒体,具有tRNA3’末端加工酶活性。本研究中,我们全面分析了Trz2失活对线粒体RNA加工和 ...