海洋来源产紫青霉G59的新霉素抗性突变株4-30新产抗肿瘤活性产物研究
微生物代谢产物是新药及其先导结构的重要来源,其中真菌次级代谢产物因具有丰富的化学多样性倍受人们关注。然而在对野生真菌进行活性筛选时,绝大多数菌株因不具备相关的生物学活性而被弃置,造成了大量自然资源的浪费。
微生物基因组学的研究表明,在常规的培养条件下,大多数次级代谢相关基因(簇)处于沉默状态,不能进行表达产生相应的次级代谢产物。近年来,本课题组围绕如何激活真菌中沉默的次级代谢途径,建立了一系列简便而有效的实验技术新方法,包括DMSO介导的硫酸二乙酯诱变,超声介导的抗生素抗性导入,以及DMSO介导的抗生素抗性导入等。
最近,本课题组又通过以无抗肿瘤活性的海洋来源产紫青霉G59作为原始菌株,采用DMSO介导的新霉素抗性筛选方法,获得了数十株具有抗肿瘤活性的新霉素抗性突变株。本文通过对DMSO介导新霉素抗性筛选所得到的3株突变株进行抗性验证实验,对突变株的新霉素抗性导入情况进行确认。
在此过程中,将新霉素抗性突变株4-30、PDN-10-2、PDN-v-2及其相应对照原始菌G59的新鲜孢子液,用新霉素分别按筛选获取各突变 ...