大鼠矽肺差异蛋白的筛选及S100A8在矽肺纤维化中作用的实验研究
目的本研究通过制备不同时期的矽肺大鼠模型,利用蛋白质组学中的双向凝胶电泳和质谱分析技术,探讨在不同时期矽肺大鼠肺组织中均呈明显差异表达的蛋白种类,并挑选其中评分最高的一种蛋白(S100A8)在矽肺动物模型和细胞水平加以验证,了解S100A8与矽肺的相关性,为矽肺的发病机制的进一步研究提供实验依据。方法1大鼠矽肺模型的复制:SPF级雄性Wistar大鼠90只适应性饲养一周,随机分为2组,模型组(即染矽尘组)60只、空白对照组30只。
模型组利用非暴露气管法一次性灌注Si O2悬液复制矽肺模型,空白对照组以灭菌生理盐水替代。建模时间记为0周,于染尘后1周、2周、3周、4周、6周和8周6个时间点处死模型组10只和空白对照组5只大鼠,同时肉眼观察大鼠肺脏病理变化,迅速取出肺组织,大部分保存在液氮中备用,并将余下肺组织甲醛固定以鉴定造模是否成功及免疫组化检查;2矽肺差异蛋白的筛选:利用双向电泳技术筛选矽肺的差异蛋白点,对所筛选的部分差异蛋白进行质谱分析;挑选其中评分最高的差异蛋白S100A8进行验证;3矽肺差异蛋白的验证:①制作大 ...