淫羊藿次苷Ⅱ抗神经元氧糖剥夺/复氧复糖损伤的作用机制研究
目的:研究淫羊藿次苷Ⅱ(ICS Ⅱ)对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)诱导的原代大鼠海马及皮质神经元损伤作用及作用机制。方法:通过OGD/R诱导原代大鼠海马及皮质神经元损伤,在体外模拟脑缺血再灌注损伤,西地那非(SIL)作为阳性药。
将原代海马神经元分为7组:空白组、空白+ICS Ⅱ 50 μM组、OGD/R组、OGD/R+ICS Ⅱ 12.5 μM组、OGD/R+ICS Ⅱ 25μM组、OGD/R+ICS Ⅱ50μM组、OGD/R+SIL 20μM组。将原代皮质神经元分为8组:空白组、空白+ICS Ⅱ 25 μM组、OGD/R组、OGD/R+ICS Ⅱ 6.5 μM组、OGD/R+ICS Ⅱ 12.5μ组、OGD/R+ICS 11 25 μM组、OGD/R+3甲基腺嘌呤(3-MA)ImM组和OGD/R+雷帕霉素20μM组。
采用MTT法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞损伤,TUNEL染色法及AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。采用计算机分子虚拟对接检测ICS Ⅱ与磷酸二酯酶5(PDE5)蛋白催化 ...