生物氧化
河南科技大学医学院生物化学与分子生物学教研室
生 物 氧 化
生物化学与分子生物学实验
【目标】
【目标】
掌握乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶及其辅酶作用机制。熟悉乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶辅助因子及其作用。观察乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶在体外不需氧脱氢作用。
【原理】
一、乳酸脱氢酶及其辅酶
一、乳酸脱氢酶及其辅酶
【原理】
乳酸脱氢酶是以NAD+为辅酶不需氧脱氢酶。它催化乳酸脱氢转变成丙酮酸。在体内，脱下氢先由NAD+接收，然后再经呼吸链传递给氧生成水。在体外试验中可用甲烯兰取代呼吸链中CoQ位置为最终受氢体，使甲烯兰还原成甲烯白。试管内加石蜡油隔绝空气，以防甲烯白再被氧化。本试验中甲烯兰既是最终受氢体又是氧化还原指示剂。
为使反应向乳酸脱氢单方向进行，试验加入KCN固定反应生成丙酮酸。