蛋白质的分离纯化测定
---介绍蛋白质分离纯化的步骤、主要方法、定量测定和纯度鉴定
为什么要进行蛋白质的分离纯化
研究目标蛋白质的结构、功能及生理学意义;
工业生产的需要:食品、发酵、纺织、制革等工业,需要大量
的高活性的酶制剂。如用淀粉酶制造葡萄糖、麦芽糖、糊精以
及糖浆等。
医疗的需要:如用猪胰岛素治疗糖尿病。
基因工程的需要
………..
蛋白质分离纯化的基本流程
细胞
抽提 分离 纯化 鉴定
破碎
回收率/纯化倍数 回收率/纯化倍数 回收率/纯化倍数 纯度/活性/性质
总蛋白和目标蛋白含量监测 总蛋白含量与酶活力监测
分离纯化的要求和目的
纯度:主要取决于研究的目的和应用上的要求。如作为研究蛋白
和一级结构、空间结构,一级结构与功能的关系的蛋白质制剂、
工具酶和标准蛋白、酶法分析的酶制剂,都要求均一;工业、医
药方面应用的酶和蛋白质制剂,达到一定纯度即可,不要求均一。
活性:要求大分子保持天然构象状态,有高度的生物活性
收率:希望收率越高越好,但在分离纯化过程中总有不 ...
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