植物原生质体的分离及融合
生72 伍国羽 2007012357
实验时间：2009年10月30日 星期六
实验目的
学习植物原生质体的分离制备技术，观察原生质体形态。
学习植物原生质体的融合技术，观察融合原生质体时其形态及变化。
实验原理
原生质体融合
(protoplast fusion)
是指将两种不同的细胞经溶菌酶或青霉素等处理，失去细胞壁成为原生质体后进行相互融合的过程。 在融合前要用纤维素酶和果胶酶除去植物体的细胞壁,获得有活性的原生质体,用电激、振动、PEG等方法将原生质体融合，在融合过程中，细胞核也会融合
，融合后的细胞比平时细胞大一些。表现出两种植物体的优良性状。
高pH--高Ca2+法和聚乙二醇(PEG)法
。高pH--高Ca2+法诱导原生质体融合的基本原理是中和原生质体表面所带的电荷,使原生质体的质膜紧密接触,从而有利于质膜的接触融合.PEG处理原生质体可以使原生质体聚集促进融合.
电融合法
。先将两种原生质体以适当比例混合成悬浮液,将其滴入电融合小室中,给小室两极以交变电流,使原生质体沿电场方向排列成串珠状,接着给以瞬间高压强度的电脉冲,使原生质体膜产生局部破损而 ...