人肝微粒体中CYP1A2，CYP2E1，CYP2C9活性检测及四种中药注射剂对其影响的研究
研究目的:考察中药注射剂曲克芦丁脑蛋白水解物注射液、大株红景天注射液、注射用红花黄色素和注射用血塞通(冻干)对人肝微粒体中三种酶CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9活性的影响。实验方法:(1)选择非那西丁、双氯芬酸和氯唑沙宗分别作为CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1的探针药物,建立体外肝微粒体孵育体系。
用HPLC法测定各个探针药物的代谢产物对乙酰氨基酚、4-羟基双氯芬酸和6-羟基氯唑沙宗的生成量的影响,计算出各自Vmax和Km,考察酶活性变化。(2)分别将不同体积百分浓度的曲克芦丁脑蛋白水解物注射液和大株红景天注射液,以及不同浓度的注射用红花黄色素和注射用血塞通(冻干)加入到人肝微粒体孵育体系中,再次测得各探针药物的代谢产物生成量,求得半数抑制浓度(IC50)。
实验结果:(1)非那西丁、双氯芬酸和氯唑沙宗及其各自内标和代谢产物峰型光滑对称,分离良好。对乙酰氨基酚、6-羟基氯唑沙宗和4-羟基双氯芬酸线性范围分别为1.00~50.0μmol·L-1、0.50~30.0μmol·L-1和 ...