丙泊酚对发育期大鼠皮质神经元钙离子的影响
全身麻醉药是否导致发育期中枢神经系统毒性是近年来深受关注的热点问题。丙泊酚是临床常用的静脉麻醉药物,具有起效迅速、作用时间短、苏醒快、易控制和副作用少等优点,广泛应用小儿麻醉和重症监护室。
但越来越多的在体或离体动物实验证实,静脉麻醉药丙泊酚对发育期神经系统具有毒性作用。丙泊酚对发育期大脑神经毒性的机制目前仍然不清楚,其中一个可能的机制是引起了神经元内钙稳态的絮乱。
发育期神经元有其特殊的生理特征,本研究拟通过体外培养的发育期神经元,研究丙泊酚对发育期皮质神经钙离子的影响。实验主要分为两部分:一,优化和改进体外培养的原代发育期皮质神经元方法,观察和鉴定发育期神经元,培养纯度高、活力好的神经元,能够满足下一步实验的要求。
二,激光共聚焦显微镜下观察Fluo-4 AM荧光染色后发育期皮质神经元形态学变化;检测不同浓度的丙泊酚(10、30、100μmol/L)对大鼠发育期皮质神经细胞内钙离子浓度的变化,评估丙泊酚对发育期皮质神经细胞L-型钙离子通道的影响。第一部分新生大鼠皮质神经元原代培养方法目的建立一种稳定、高效、简单可行的新生大鼠大脑皮质神经元原 ...