丙泊酚对外源性Ca～（2+）致鼠心肌线粒体损伤的保护作用
目的观察丙泊酚(Propofol)对外源性Ca2+致鼠心肌线粒体损伤的影响。方法用217～234g 健康Wistar 大鼠35 只,断头处死迅速取出心脏并充分剪碎,然后用电动玻璃匀浆机匀浆约10 个冲程。
差速分级离心制备线粒体悬液。然后用双缩脲法测定线粒体蛋白含量及对线粒体纯度和活性进行酶学测定, 弃用活性偏低(<5.6±1.4)的标本。
实验随机分为5 组(n=7),取1mg 线粒体加入2ml 反应缓冲液中孵育2min 后,分别进行不同的处理。其中A 组不做任何处理, B 组(CaCl2组)加入CaCl2100nmol/mg prot,C～E 组(丙泊酚组)于CaCl2 100nmol/mg prot 加入之前分别加入不同浓度丙泊酚(25μM 、50μM、100μM)。
记录0、4、8、12、16、20min 各时间点吸光度值(A值),以A值表示线粒体膜MPT大小。然后将线粒体悬液13000g 4°C 离心10min 取上清液行Western blotting 来反映Cyt C 的释放情况。
结果MPT 的测定:B 组 ...