丙泊酚对小鼠脾源性树突状细胞的影响及其受体机制的研究
目的:本次实验旨在观察丙泊酚对正常脾源性树突状细胞和脂多糖激活后树突状细胞的分化及表面分子MHC II和CD80的影响,同时从脂多糖(LPS)-Toll样受体4(TLR4)通路和神经内分泌免疫网络(β1肾上腺素能受体通路)两个角度初步探索其可能存在的相关受体机制,进一步明确丙泊酚的免疫调节特性和抗炎作用,从而为丙泊酚在危重病人中的合理应用提供一定的实验基础和理论参考。方法:本次实验的研究靶点是小鼠脾源性的树突状细胞,本次实验主要应用的检测技术是流式细胞术。
具体方法如下:1本次实验使用的动物是6到8周的雄性BALB/c小鼠,体重20±1克。采用颈椎离断法将小鼠处死,当即无菌下取出小鼠脾脏,采用小鼠淋巴细胞分离液法制备小鼠脾源性单个核细胞悬液,之后采用磁珠分选的方法获得小鼠脾源性树突状细胞。
2实验分为四组,即正常对照组;丙泊酚刺激组(5,10和20ug/ml);脂多糖(1ug/ml)刺激组和1ug/ml脂多糖+丙泊酚(5,10和20ug/ml)刺激组。树突状细胞被均匀种植在48孔培养板中,实验分在两个培养板同时进行,其中一个培养板主 ...