丙泊酚对脂多糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞的影响
目的本文旨在通过用脂多糖刺激小鼠肾小球系膜细胞来研究丙泊酚对脂多糖刺激的肾小球系膜细胞的增殖、凋亡及分泌NO的影响。方法实验采用的是小鼠肾小球系膜细胞(SV40MES13),当细胞培养至3-5代时,常规消化收集细胞,调整细胞浓度,均匀种植在两块48孔板和一块96孔板上。
将细胞分为8组,即空白对照组、丙泊酚组(5,10,20μg/ml)、脂多糖组(10μg/ml)和脂多糖(10μg/ml)+丙泊酚(5,10,20μg/ml)组,每组各设6个复孔。按照以上分组向各个孔内添加不同药物刺激,脂多糖(10μg/ml)+丙泊酚(5,10,20μg/ml)组需在添加脂多糖1小时后再加入不同剂量的丙泊酚。
最后将细胞放入CO2培养箱继续培养48小时。在倒置显微镜下观察细胞生长情况并照相,并通过MTT法检测细胞的增殖程度;收集各孔细胞培养基用于ELISA法检测细胞分泌NO的情况,并消化收集各孔细胞,采用流式细胞仪进行检测分析细胞的凋亡情况。
结果1倒置显微镜下观察,脂多糖组细胞数量明显多于空白对照组与单纯丙泊酚组,且细胞均由不规则形变成圆形;脂多糖+丙泊酚 ...