大豆种子中菜豆荚斑驳病毒的RT-LAMP检测和大豆花叶病毒表达载体的构建
大豆是一种富含优质蛋白、无胆固醇油脂、多种糖类碳水化合物和微量物质的杂粮作物,是饲料、油料和蛋白质的重要来源,也是用地、养地和保持生态平衡的重要作物。本研究以大豆为中心,在大豆上开展病毒病快速检测技术的研究和植物病毒表达载体的构建以用于大豆病害的防预和基因功能的研究。
BPMV的RT-LAMP检测：菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus, BPMV)是一种广泛分布于大豆产区且易造成经济损失的灾害性病毒,在我国被列为检疫性病毒。本研究将RT-LAMP技术和RNA快速抽提法相结合,建立一种用于检测大豆种子中BPMV的一步法RT-LAMP检测技术。
该技术包括所设计的引物和优化过的反应体系。经过测试,该技术能够在大豆种子中快速、特异、准确地检测出BPMV且无交叉反应;其最适工作温度为62.5-65℃可工作模板剂量范围为0.2-1.8μL/10μL;灵敏度为BPMV RT-PCR的1000倍。
因此,该技术可以作为BPMV检验检疫以及预防BPMV大规模爆发的有效工具。SMV表达载体的构建：尽管已有一些 ...