低钙敏感拟南芥自然变异种的筛选及相关基因的粗定位
为了能够更好地理解植物在低钙逆境中生长发育的分子机制,本实验主要以拟南芥自然变异种为材料,通过对96种自然变异种进行筛选,筛选出一株低钙敏感自然变异种Wt-5,对其进行表型分析,发现Wt-5与拟南芥野生型Col-0相比,在低钙培养基(含有0μM CaCl2、20μM CaCl2)中具有根短、叶小而且黄的表型,而在CK培养基(含有1mM CaCl2)中表型无明显差异。通过原子吸收光谱的方法测定自然变异种Wt-5体内的总钙含量,发现生长在CK培养液中的Wt-5和野生型Col-0相比,体内总钙含量低于Col-0；当给予低钙处理后,发现在叶片(大叶或小叶)中,Wt-5体内的总钙含量仍低于Col-0。
我们将Wt-5与生态型Ler进行杂交,得到F1和F2代植株,经分析显示Wt-5为单基因隐性突变体。再利用图位克隆技术,将突变位点粗定位至拟南芥2号染色体18.14M -19.5Mbp范围内。