几丁质酶高产芽孢杆菌的筛选及基因克隆与表达
本研究从武汉土壤中筛选出了六株产几丁质酶的芽孢杆菌。通过16S rRNA基因分子鉴定,确定其中4株(D1,D2,D3和D4)为Paenibacillus illinoisensis,另外2株(CDY-607和W1)为解木聚糖类芽孢杆菌(Paenibacillus xylanilyticus),以解木聚糖类芽孢杆菌CDY-607为出发菌株获得研究结果如下:解木聚糖类芽孢杆菌CDY-607几丁质酶发酵液最适反应温度为55℃,最适反应pH值为6.5和8.0,金属离子Fe2+对几丁质酶酶活力有促进作用。
对解木聚糖类芽孢杆菌CDY-607产几丁质酶发酵培养基配方及培养条件进行优化,结果表明CDY-607产几丁质酶最佳发酵时间为96 h,最佳接种量为5%,最佳装瓶量为100 mL,最佳培养基pH值为6.5。产几丁质酶最适发酵培养基配方为胶体几丁质5 g/L,硫酸亚铁2 g/L,蛋白胨2 g/L,酵母膏5 g/L。
在最适条件下测定的发酵液酶活力(49.26 mU/m L)是未优化发酵培养基发酵液酶活力(24.62 mU/m L)的2倍。在PCR扩增获得 ...