尾叶香茶菜素A对肝癌细胞中HIF-1α及其靶基因的影响
目的与背景:缺氧诱导型转录因子-1(HIF-1),是介导肿瘤细胞和组织适应缺氧微环境的异二聚体转录因子,对肿瘤生长施加不同的影响的重要的癌症标志物。文献已经报道HIF-1在多种病因引起的肝病发病机理中起作用。
来源于唇形科植物的尾叶香茶菜因其抗炎、抗肿瘤作用备受关注,但其有效成分:二萜类化合物尾叶香茶菜素A以HIF-1α为作用靶标的抗肿瘤作用机制尚不十分明确。因此,此次研究探讨尾叶香茶菜素A对HIF-lα及其靶基因的影响。
方法:首先,用荧光素酶报告基因实验以及细胞存活实验,检测药物对HIF-lα转录活性及细胞毒性的影响。其次,免疫印迹分析实验检验尾叶香茶菜素A对Hep3B/Sk-hepl细胞中HIF-lα的蛋白水平以及作用机制;接下来用免疫荧光染色实验进一步验证尾叶香茶菜素A对乏氧诱导的HIF-lα的蛋白细胞核内的累积的影响。
然后,RT-PCR验证尾叶香茶菜素A可对HIF-lα调控的靶基因VEGF mRNA的表达的影响。最后,MTT细胞增殖实验、细胞集落实验、EdU实验、流式细胞周期实验以及免疫印迹分析实验检验尾叶香茶菜素A对 ...