大白菜BrSKS13基因在花粉发育中的功能鉴定
大白菜是异花授粉作物,杂种优势明显,杂交制种已成为国内外大白菜抗病、优质、稳产育种的首要措施。前期通过抑制差减杂交技术(SSH)在大白菜雄性不育两用系‘A02’中找到一段有显著性差异的基因片段,通过NCBI比对,发现与拟南芥SKS13(At3g13400)同源性最高,故命名为BrSKS13。
本研究通过qRT-PCR,原位杂交进行表达模式分析预测了BrSKS13的生物学功能;通过对拟南芥同源缺失突变体sks13花粉表型及花粉萌发等实验鉴定了该基因的功能;将BrSKS13基因转入拟南芥同源缺失突变体sks13,进一步验证功能恢复。主要结果如下:1.为了确定BrSKS13的时空表达模式,利用RT-PCR技术分析了它在大白菜可育株和不育株的根、茎、叶和花蕾中的表达情况,发现在可育株花蕾中有较高表达;又对该基因在可育花蕾的花瓣、花萼、花药和雌蕊中的表达情况进行分析,发现在花药中有较高表达;进一步分析该基因在花药六个等级中的表达情况,发现表达量随着花药等级的增加表现为上调。