尼古丁在吸烟导致气道慢性炎症中的独特效应
目的:比较单纯尼古丁与烟草抽提物对培养气道上皮细胞的效应特点,并进一步了解经香烟和尼古丁诱导后的改变规律,以及相关炎性因子表达的诱导效应差异,明确尼古丁在致炎抗炎及黏液高分泌方面的功过地位;同时明确尼古丁作用的膜受体在正常气道的分布规律及表型;并进一步了解尼古丁可能存在的抗炎效应的分子机制及相关信号转导途经。为香烟成份改良提供努力方向,为尼古丁替代疗法提供理论依据,同时帮助完善对尼古丁外周作用的认识,有助于进一步拓展尼古丁的有益使用范围。
方法:(1)体外培养人气道上皮细胞系HBE16细胞,予以不同浓度的香烟氯仿抽提物(CE)、尼古丁刺激,选取最佳作用浓度。观察刺激前后细胞的生长和增殖情况,采用ELISA技术测定各组细胞经CE、尼古丁、脂多糖(LPS)刺激后培养上清中前炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-8、IL-6及黏蛋白(MUC)5AC蛋白相对含量,real-time PCR检测细胞中上述因子的转录水平变化情况,免疫荧光化学法观察细胞中MUC5AC的表达情况。
(2)以人脑胶质瘤细胞株U251细胞为阳性对照,分别设立CE组、 ...