尼古丁和神经尼古丁受体CHRNA3调控Hippo通路促进食管癌的生长和侵袭转移
本研究通过对食管癌基因组进行甲基化测试,发现神经尼古丁受体3(CHRNA3)启动子区域在食管癌细胞系中高甲基化,并用realtime PCR和western blot方法验证了CHRNA3在食管癌临床样本中蛋白表达量,发现CHRNA3在部分食管癌临床样本中下调。为了解CHRNA3下调对食管癌细胞的生物功能影响,我们在食管癌细胞系中敲降CHRNA,通过MTT生长曲线实验,发现敲降CHRNA3导致食管癌细胞生长速率增加,侵袭转移能力升高。
同时我们验证了尼古丁对食管癌细胞生长和侵袭转移能力的促进作用。免疫荧光实验显示向食管癌细胞培养基中添加尼古丁或敲降尼古丁受体CHRNA3均能导致Hippo通路重要转录因子YAP1(Yes-associated protein1)入核,并激活其下游基因的转录。
我们用realtime PCR方法验证了食管癌细胞中YAP1下游基因在经过尼古丁处理或敲降尼古丁受体CHRNA3之后被上调。我们对敲降尼古丁受体CHRNA3或尼古丁处理食管癌细胞之后激活YAP1的分子机制做了进一步研究, ...