乳鼠肾细胞的原代培养
生72伍国羽2007012357
实验日期:
2009年
11月27日星期五实验目的
掌握原代细胞培养的原理与操作方法,了解无菌操作的条件和注意事项;
了解并通过实践学习处死与解剖乳鼠和识别、取出乳鼠肾脏的方法;
学习细胞原代培养和传代培养的方法。
实验原理
新生约3天的乳鼠体内的组织与器官均没有发育成熟,处于旺盛的分裂生长时期,因此是用作细胞培养的良好材料,适当的培养就可以观察到贴壁和分裂增殖现象。由于肾脏的细胞类型较为单一并且肾脏本身易于从乳鼠体内取出,将肾作为实验材料是较好的选择
。在进行细胞培养之前,首先要从组织中提取出大量的分散的单细胞并制备成细胞悬液。这就需要首先破坏细胞外基质以及细胞连接对组织细胞的“束缚”。胚胎或新生动物的组织中细胞外基质和细胞连接并没有充分形成,这也是将新生动物作为实验材料的原因之一。
原代培养也称初代培养,严格的说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相 ...
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