消退素D1在HaCat细胞及咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮肤炎症中的抗炎作用及机制研究
第一部分SIRT1通过抑制NF-κB乙酰化减少脂多糖诱导的HaCaT细胞炎症因子分泌目的:研究消退素D1(resolvin D1,RvD1)对脂多糖(LPS)诱导的HaCaT细胞增殖的作用及机制。研究沉默信息调节因子1(SIRT1)对脂多糖诱导的HaCaT细胞分泌炎症因子及NF-κB p65蛋白乙酰化的影响。
方法:实验分为4组:正常对照组、LPS(10ug/ml)组、LPS(10ug/ml)+RvD1(100nmol/L)组和SIRT1 RNAi组。首先采用CCK-8法检测RvD1及LPS对HaCaT细胞活力的影响;通过逆转录PCR(RT-PCR)检测脂氧素受体(ALX)、G蛋白偶联受体32(GPR32)及TLR4在HaCaT细胞上的表达情况;QRT-PCR检测不同时间点SIRT1 m RNA水平;QRT-PCR及ELISA分别从m RNA及蛋白水平检测不同时间点IL-1β和TNF-α表达的变化情况;Western blot检测SIRT1和NF-κB p65乙酰化蛋白的表达水平。
结果:使用不同浓度 ...