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2025-06-22
实验四、农杆菌转化烟草和拟南芥
Arabidopsis thaliana
Nicotiana tabacum
选择标记基因与报告基因
必备条件:编码一种不存在于正常植物细胞中的酶基因较小能在转化体中得到充分表达检测容易,并且能定量分析选择标记基因与筛选标记基因:npt-II 新霉素磷酸转移酶基因(卡那,新霉素,G418),aat(链霉素,壮观霉素),spe(壮观霉素),strl(链霉素),cat(氯霉素),bar(草苷膦)报告基因:report gene(筛选标记之一)在转化系统中通过瞬时及稳定表达检测来确定转化的DNA顺序(基因)是否能在转化细胞中得到表达,起到报告的作用。gus基因(β-葡萄糖苷酸酶基因),gfp(绿色荧光蛋白基因)转化目的基因可以省略附加的报告基因,但选择标记基因是不可缺少的。
植物基因转化受体
高效稳定的再生能力较高的遗传稳定性具有稳定的外植体来源对选择性抗生素敏感对农杆菌侵染有敏感性
植物基因转化受体系统类型:愈伤组织再生系统直接分化再生系统原生质体再生系统胚状体再生系统生殖细胞受体系统
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