大肠杆菌
培养一、菌种
冻存液的制备
含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40%甘油，-80
oC冻存。
二、培养基制备
LB培养基配方（胰化蛋白胨（
Trypton
）：10 g
/L；酵母提取物
（Yeast Extract
）：5g/L；NaCl
：10g/L；pH7.
4）液体培养基
胰化蛋白胨10.0g
酵母粉5.0g
氯化钠10.0g水1000ml
pH7.4固体培养基在液体培养基的基础上再加入
1.5％－2.0％的琼脂
三、平板的制备
称取胰化蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，NaCl
10.0g，加入800mL二次水溶解，
并用玻璃棒搅拌均匀，
用1mol/L的NaOH调pH至7.4
左右，定容至1L，
调pH7.
4（若溶液
pH大于7.4，用1mol/L HCl
回调）。
分装在锥形瓶中，每瓶量不宜太多，没过瓶底一指左右。如需固体培养基在分装后的液体培养基内加入约2%的琼脂（150mL液体培养基加入2.5g琼脂）
。在锥形瓶口依次覆盖带滤纸通气小孔的塑料膜和硬质纸，用
皮筋捆好。所有锥形瓶如上述操作。用记号笔注明培养基名称、配制日期。
高压蒸汽灭菌锅
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