体外释放组胺肥大细胞模型在过敏原分析中的应用
[目的]用本实验室建立的组胺体外释放肥大细胞模型,将过敏原的不同组分置酶标板孔中诱发致敏肥大细胞释放组胺,通过组胺释放的量,分析过敏原中不同过敏原组分的致敏差异性。该方法可作为体外分析过敏原不同组分的致敏性强弱、确定过敏原诊断以及抗体芯片的必需组分和评价过敏原疫苗效果。
[方法]虾粗制过敏原与尘螨粗制过敏原分别免疫C57/BL6小鼠,收集小鼠腹腔致敏肥大细胞(PMC),分别用虾、尘螨中不同过敏组分诱导PMC释放组胺,分别用组胺试剂盒、荧光法检测其释放水平,并进行比较。[结果]从虾蛋白中纯化出80KD、36KD和21KD等三种虾致敏蛋白,分别用这三种致敏蛋白诱导PMC释放组胺,80KD、36KD诱导释放的组胺最高,21KD蛋白次之,表明80KD、36KD蛋白是虾致敏蛋白中的主要过敏原;虾致敏蛋白混合诱导明显比单一组分诱导释放组胺多,并低于致敏蛋白单一诱导的组胺量的叠加,表明虾蛋白组分在诱导释放组胺中存在协同效应。
尘螨致敏蛋白中,Der f2致敏性强于Der f1,说明Der f2是尘螨致敏蛋白中的主要致敏原,尘螨混合诱导PMC释放组胺时,随 ...