大白菜BAC文库的构建及CO相关基因BAC克隆的筛选与分析
大白菜为十字花科芸薹属植物中重要的蔬菜作物,也是我国种植面积最大的叶用蔬菜。随着分子生物学的发展,基因组结构和功能、基因表达调控的分子机制等成为了蔬菜专家研究的热点问题。
大片段基因组文库的构建是基因组学研究必不可少的工具。尽管国际上已经构建了大白菜的基因组文库,但有关芸薹属基因组结构和功能研究依然处于初级阶段,为了给我国大白菜基因组结构及功能研究提供方便,构建我国优良自交系的BAC文库也是当务之急。
大白菜主要以营养器官为产品,早期抽薹是大白菜春季生产的主要障碍,严重影响着它的产量和品质,因此,研究培育大白菜晚抽薹品种,满足市场的周年供应成为蔬菜育种工作者的重要任务。研究大白菜开花相关基因及调控的分子机制将为培育抗抽薹新品种提供理论基础及分子鉴定手段。
本文以我国优良的大白菜自交系‘85-1’为材料,利用pIndigoBAC5为载体,以HindⅢ为限制性内切酶,经过高分子量DNA的制备、DNA与载体的连接、转化等过程,成功构建了大白菜BAC文库。通过构建混合池,用PCR方法筛选了大白菜含有CO相关基因的BAC克隆,并对扩增产 ...