PACAP葡萄糖依赖性促进大鼠胰岛素分泌及机制研究
目的:研究垂体腺苷酸环化酶激活肽（Pituitary Adenylate Cyclase-Activating Polypeptide,PACAP）对大鼠胰岛胰岛素分泌的影响及其在胰岛β细胞中的作用机制,为进一步探讨胰岛素分泌的调控机制,寻找治疗糖尿病的潜在靶点提供实验依据。方法:采用正常雄性Wistar大鼠胰岛及胰岛β细胞为研究对象。
大鼠急性处死后,将胶原酶P经胆总管注入胰腺内消化11分钟,培养液终止消化,Histopaque 1077梯度离心得到散在的大鼠胰岛颗粒,再经DispaseⅡ消化胰岛为单个胰岛细胞。（1）胰岛素分泌实验探究在不同环境下PACAP对大鼠胰岛胰岛素分泌的影响。
（2）膜片钳技术探讨PACAP与单个胰岛β细胞动作电位的关系。全细胞电压钳模式下研究在不同条件下PACAP与单个胰岛β细胞电压依赖性钾（Kv）通道电流及电压依赖性Ca2+（VDCC）通道电流的关系。
（3）利用钙成像技术监测在不同干预下胰岛β细胞内Ca2+浓度变化。结果:（1）PACAP在2.8 mmol/L葡萄糖作用下对大鼠胰岛胰岛素分泌无影响,但 ...