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2025-04-03
小麦矮秆基因同源序列的克隆与BAC源合池的构建
太谷核不育小麦是我国1972年发现的一份珍贵小麦材料,其不育性受显性单基因控制。它是世界上发现的第一份小麦显性核不育材料,具有巨大的经济价值和理论研究价值。
矮败小麦是具有矮秆基因标记的显性核不育材料,其显性不育基因Ms2与显性矮秆基因Rht10紧密连锁,二者之间的连锁交换率不超过0.18%。本研究采用RT-PCR、等位特异PCR、构建和筛选BAC混合池等技术,获得了一个与Rht-D1c(Rht10)关系密切的矮秆基因,这一结果为最终分离矮败中国春小麦中的不育基因奠定了基础。
实验所用材料为以中国春为轮回亲本回交十代的矮败中国春小麦。 根据普通小麦中与矮秆基因Rht-D1b(Rht2)等位的野生型基因Rht-D1a序列设计合成了六对相互重叠的特异性引物,采用RT—PCR技术分别从矮败中国春小麦矮秆和高秆材料中扩增出六段大小不同的产物,经克隆测序后,通过引物拼接的方法获得了两个矮秆基因的同源序列,分别暂定名为Rh和H基因。
与GenBank数据库中已知序列的比对分析表明,它们在氨基酸序列上分别与普通小麦、大麦、玉米、水稻和拟南芥等物种中调节 ...
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