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2025-05-07
DNA粗提取与判定
1、鸡血细胞做试验材料,一是因为鸡血细胞核DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破。2、预冷乙醇溶液含有以下优点:一是抑制核酸水解酶活性,预防DNA降解,二是降低分子运动,易于形成沉淀析出,三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,降低断裂;
注意:
依据以上原理可设计提取和纯化DNA方案:方案一:30mL含DNA滤液+2mol/L NaCl→同方向搅拌,DNA溶解→加入蒸馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶解液方案二:30mL滤液+嫩肉粉(木瓜蛋白酶)→静置10~15分钟→DNA滤液方案三:30mL滤液→60~75℃恒温保温10~15分钟→过滤取得DNA滤液
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